जर्नल ऑफ़ न्यूरोसाइंस एंड क्लिनिकल रिसर्च

MyoD के प्रति एंटीबॉडी मायोजेनिन जीन अभिव्यक्ति और एग्रीन-प्रेरित एसिटाइलकोलाइन रिसेप्टर क्लस्टरिंग को कम करती है

एरिका ई एंडरसन, डेविड एच कैम्पबेल, केली एज़ेल, पॉल आर स्टैंडली और वेड ए ग्रो

उद्देश्य: MyoD और मायोजेनिन सहित मायोजेनिक विनियामक कारकों का एक परिवार मायोजेनेसिस और न्यूरोमस्कुलर सिनैप्स गठन का मार्गदर्शन करता है। मायोजेनिन जीन अभिव्यक्ति MyoD द्वारा सक्रिय होती है, और मायोजेनिन के कार्यों में से एक न्यूरोमस्कुलर सिनैप्स पर एसिटाइलकोलाइन रिसेप्टर (AChR) की जीन अभिव्यक्ति को सक्रिय करना है। मोटर न्यूरॉन्स विकास में कंकाल की मांसपेशी फाइबर के पास एग्रीन छोड़ते हैं, जो न्यूरोमस्कुलर सिनैप्स गठन की साइट पर मौजूदा AChRs के क्लस्टरिंग को प्रेरित करता है। हमने पहले दिखाया है कि MyoD या मायोजेनिन के प्रति एंटीबॉडी के निरंतर संपर्क से C2C12 कंकाल की मांसपेशी सेल संस्कृति में एग्रीन-प्रेरित AChR क्लस्टरिंग कम हो जाती है। हमारा उद्देश्य अधिक विशिष्ट रूप से यह स्थापित करना था कि विकास में MyoD और मायोजेनिन कैसे परस्पर क्रिया करते हैं। विधियाँ: C2C12 सेल संस्कृतियों को MyoD और मायोजेनिन, और मायोजेनिन मॉर्फोलिनो के प्रति एंटीबॉडी सहित प्रयोगात्मक हेरफेर के संपर्क में लाया गया। प्रयोगात्मक हेरफेर के सेल अपटेक को बढ़ाने के लिए एंडो-पोर्टर का उपयोग किया गया था। एग्रीन-प्रेरित AChR क्लस्टरिंग पर एंटीबॉडी या मॉर्फोलिनो के प्रभाव का आकलन करने के लिए AChR क्लस्टरिंग परख की गई। एंटीबॉडी या मॉर्फोलिनो के संपर्क के बाद मायोजेनिन जीन अभिव्यक्ति का आकलन करने के लिए वेस्टर्न ब्लॉट किए गए। परिणाम: यहाँ रिपोर्ट किए गए परिणाम प्रदर्शित करते हैं कि मायोजेनिन के लिए एंटीबॉडी के आठ घंटे से भी कम समय के संपर्क से मायोट्यूब में एग्रीन-प्रेरित AChR क्लस्टरिंग कम हो सकती है। हमने पहले प्रदर्शित किया है कि कुछ प्रायोगिक हेरफेर एग्रीन-प्रेरित AChR क्लस्टरिंग में कमी के साथ-साथ मायोजेनिन जीन अभिव्यक्ति को कम करते हैं। वर्तमान परिणाम अधिक विशिष्ट रूप से स्थापित करते हैं कि MyoD और मायोजेनिन न्यूरोमस्कुलर सिनैप्स गठन में कैसे परस्पर क्रिया करते हैं, यह प्रदर्शित करके कि MyoD के लिए एंटीबॉडी के संपर्क में आने से एग्रीन-प्रेरित AChR क्लस्टरिंग में कमी के साथ-साथ मायोजेनिन जीन अभिव्यक्ति कम हो जाती है। निष्कर्ष: इन परिणामों से पता चलता है कि MyoD एग्रीन-प्रेरित AChR क्लस्टरिंग के लिए एक तंत्र के माध्यम से आवश्यक है जिसमें मायोजेनिन जीन अभिव्यक्ति का सक्रियण शामिल है, जिससे AChR जीन अभिव्यक्ति का सक्रियण होता है, और अंततः एग्रीन-प्रेरित AChR क्लस्टरिंग और न्यूरोमस्कुलर सिनैप्स गठन के लिए AChR के एक उपयुक्त स्तर का उत्पादन होता है।