जर्नल ऑफ़ मॉलिक्यूलर बायोलॉजी एंड मेथड्स

क्यूआरटी-पीसीआर के माध्यम से प्लेसेंटल जीडीएनए और एमआरएनए का उपयोग करके चूहे के भ्रूण लिंग निर्धारण की तुलना

एंथनी एल सु और रीता लोच-कारुसो

भ्रूण के लिंग को एक जैविक चर के रूप में मानने और लिंग-विशिष्ट प्रभावों का सटीक आकलन करने की आवश्यकता बढ़ती जा रही है। भ्रूण के लिंग का निर्धारण करने के लिए उपयोग की जाने वाली कई विधियों में से, जीनोमिक डीएनए (जीडीएनए) के साथ एसआरवाई (लिंग निर्धारण क्षेत्र वाई) की मात्रात्मक वास्तविक समय पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन (क्यूआरटी-पीसीआर) का आमतौर पर ट्रांसक्रिप्टोमिक्स और बार बॉडी का पता लगाने जैसी विधियों के उपयोग के अलावा उपयोग किया जाता है। हालांकि, एसआरवाई मैसेंजर आरएनए (एमआरएनए), जो कि एसआरवाईजीडीएनए का एक उत्पाद है, का पहले लिंग निर्धारण के लिए मूल्यांकन नहीं किया गया है। गर्भकालीन दिन (जीडी) 16 पर समयबद्ध गर्भवती विस्टार चूहों से प्लेसेंटल नमूनों का उपयोग करते हुए, इस अध्ययन ने भ्रूण के लिंग का निर्धारण करने के लिए एमआरएनए बनाम जीडीएनए का उपयोग करके एसआरवाई का पता लगाने की संगतता का आकलन किया। इस वर्तमान अध्ययन में उपयोग किए गए नमूने एक बड़े अध्ययन से आते हैं जिसमें ट्राइक्लोरोइथिलीन (टीसीई) प्रजनन विषाक्तता और एन-एसिटाइल-एल-सिस्टीन (एनएसी) और एमिनोऑक्सीएसिटिक एसिड (एओएए) द्वारा संभावित मॉड्यूलेशन की जांच की गई थी। 91 में से 90 नमूनों में, gDNA द्वारा निर्धारित लिंग वर्गीकरण mRNA द्वारा Sry (Sry/B2m) मानों का विश्लेषण करके निर्धारित लिंग वर्गीकरण से मेल खाता था। gDNA और mRNA दोनों के लिए, नर और मादा के बीच Sry/B2m मानों में सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण अंतर नमूनों पर समग्रता से विचार करने और जब नमूनों को उपचार समूहों द्वारा अलग किया गया था (सभी तुलनाएँ p<0.01 या उससे कम थीं, और दो तुलनाओं को छोड़कर सभी p<0.001 या उससे कम थीं) देखे गए। अंत में, भ्रूण के लिंग और B2m संदर्भ जीन को निर्धारित करने के लिए SryCq मानों का उपयोग करने की वैधता पर भी चर्चा की गई। साथ में, यह अध्ययन सुझाव देता है कि विस्टार चूहों में भ्रूण के लिंग का निर्धारण gDNA या mRNA में Sry माप का उपयोग करके अत्यधिक संगत परिणामों के साथ पूरा किया जा सकता है।