कार्डियोवास्कुलर रिसर्च के अंतर्राष्ट्रीय जर्नल

हृदय संबंधी रोगों में परिसंचारी एंडोथेलियल कोशिकाओं और एंडोथेलियल प्रोजेनिटर कोशिकाओं के फ्लो-साइटोमेट्रिक परिमाणीकरण की टेस्ट-रीटेस्ट विश्वसनीयता

जोसेफिन वैगनर1, फैबियन वीसरॉक1, मैक्स फ्रिट्स्का2, सेबेस्टियन बेकमैन1, साइमन लिटमीयर1, एल्विस ताहिरोविक1, सारा रेडेनोविक3, एंड्रियास बुसजाहन4, थॉमस क्रैन5, विल्फ्रेड दीन्ह6* और हंस-डर्क डुंगन1*#

परिसंचारी एंडोथेलियल कोशिकाएं (सीईसी) और एंडोथेलियल प्रोजेनिटर कोशिकाएं (ईपीसी) एंडोथेलियल डिसफंक्शन (ईडी) के मात्रात्मक सरोगेट बायोमार्कर के रूप में महत्व प्राप्त कर रही हैं। एक सामान्य परिभाषा की कमी और, परिणामस्वरूप, एक मानकीकृत परिमाणीकरण विधि ने इन बायोमार्करों की नैदानिक ​​प्रयोज्यता को सीमित कर दिया है। इन मापदंडों की पूरी क्षमता को प्राप्त करने के लिए एक विश्वसनीय, पुनरुत्पादनीय और व्यावहारिक विधि की आवश्यकता है। इस अध्ययन का उद्देश्य हृदय रोग वाले रोगियों से मानव पूरे रक्त में सीईसी और ईपीसी के प्रवाह साइटोमेट्रिक परिमाणीकरण की एक छोटी अवधि (~ 7 दिन) में टेस्ट-रीटेस्ट विश्वसनीयता का मूल्यांकन करना था। 100 रोगियों (औसत आयु, 65 ± 10 वर्ष, 30 महिलाएँ) को 4 रोगी समूहों वाले एक संभावित अध्ययन में नामांकित किया गया: कम इजेक्शन अंश के साथ हृदय विफलता (HFrEF; n=25), संरक्षित इजेक्शन अंश के साथ हृदय विफलता (HFpEF; n=26), मधुमेह अपवृक्कता (DN; n=25), और उच्च रक्तचाप (HTN; n=24)। इसके अलावा, 11 स्वस्थ स्वयंसेवकों को एक नियंत्रण समूह के रूप में शामिल किया गया था। 2 अध्ययन यात्राओं में, एक रक्त का नमूना लिया गया, जिसकी तैयारी और विश्लेषण का एक समान क्रम था। CECs (DNA+, CD45dim, CD31+, और CD146+) और EPCs (CD45dim, CD34br, CD133+, और CD31+, FSClow- मध्यम, SSClow) को फ्लो साइटोमेट्री के माध्यम से गिना गया। अल्पकालिक परीक्षण-पुनःपरीक्षण विश्वसनीयता का आकलन करने के लिए, 2 अध्ययन यात्राओं में प्राप्त मापों के सहसंबंध (इंट्राक्लास सहसंबंध) और सहमति (ब्लैंड-ऑल्टमैन प्लॉट) का मूल्यांकन किया गया। सभी रोगियों में, औसत CECs/mL और EPCs/mL विज़िट 1 पर 12 (5वां/95वां प्रतिशतक: 6/22) और 679 (447/1281) थे और विज़िट 2 पर क्रमशः 11 (6/24) और 736 (510/1105) थे; इंट्राक्लास सहसंबंध (ICC) CEC गणना (0.106; ICC- 95% CI -0.08–0.29) के लिए खराब था और EPC गणना (0.9; 0.86–0.93) के लिए अच्छा था। HFpEF वाले रोगियों में, ICC CEC काउंट के लिए खराब था (0.294; 95% CI -0.08–0.6) और EPC काउंट के लिए मध्यम शक्ति थी (0.694; 0.43–0.85)। HFrEF वाले रोगियों में, ICC CEC काउंट के लिए खराब था (0.076; -0.32–0.45) और EPC काउंट के लिए उत्कृष्ट शक्ति थी (0.946; 0.88–0.98)। DN वाले रोगियों में, ICC CEC काउंट के लिए खराब था (-0.031; -0.44– 0.37) और EPC काउंट के लिए उत्कृष्ट शक्ति थी (0.946; 0.88–0.98)। HTN वाले रोगियों में, ICC CEC काउंट के लिए खराब था (0.143; -0.27–0.51) और EPC काउंट के लिए मध्यम शक्ति थी (0.668; 0.37–0.84)। स्वस्थ नियंत्रण में, ICC CEC गणना (0.378; -0.26–0.78) के लिए खराब था और EPC गणना (0.846; 0.59–0.96) के लिए ताकत में अच्छा था। एक ब्लैंड-ऑल्टमैन प्लॉट ने भिन्नताओं और बढ़ती औसत CEC गणनाओं के बीच सकारात्मक सहसंबंध दिखाया; औसत EPC गणनाओं के लिए कोई अलग रुझान नहीं थे। हमारे विश्लेषण से संकेत मिलता है कि HFpEF, HFrEF, DN और HTN वाले रोगियों में EPC सांद्रता का फ्लो साइटोमेट्रिक क्वांटिफिकेशन विश्वसनीय है। CEC सांद्रता के क्वांटिफिकेशन ने सभी रोगी समूहों में खराब टेस्ट-रीटेस्ट विश्वसनीयता दिखाई। इस खोज की प्रकृति को स्पष्ट करने के लिए आगे के शोध की आवश्यकता है, जो गंभीर ईडी वाले रोगियों में उच्च जैविक परिवर्तनशीलता के कारण हो सकता है।क्लिनिकल परीक्षण पंजीकरण पहचानकर्ता: NCT02299960.