पशु चिकित्सा विज्ञान एवं चिकित्सा निदान जर्नल

जीनस-विशिष्ट पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन प्रोटोकॉल द्वारा कोशिका संवर्धन में माइकोप्लाज्मा एसपीपी का पता लगाना

क्लाउडिया एफ. लोबोस, मारिया ए. मार्टिनेज और कार्लोस ओ. नवारो

माइकोप्लाज्मा एसपीपी के साथ सेल कल्चर का संदूषण बुनियादी जांच और जैविक उत्पादों के विकास को जटिल बनाता है। संवर्धित कोशिकाओं पर इन जीवाणुओं के प्रभाव चयापचय, प्रतिरक्षात्मक और जैव रासायनिक गुणों, विकास, व्यवहार्यता आदि में परिवर्तन हैं। सेल कल्चर पर माइकोप्लाज्मा एसपीपी संक्रमण का
दृश्य निरीक्षण या सामान्य माइक्रोस्कोपी द्वारा पता नहीं लगाया जा सकता है। इसलिए, अत्यधिक समझदार और अत्यधिक विशिष्ट तेज़ विधि के साथ नियमित आवधिक मूल्यांकन से गुजरना महत्वपूर्ण है। पिछले कथन के संबंध में, यह संस्मरण माइकोप्लाज्मा एसपीपी के आणविक निदान पर आधारित था, चिली विश्वविद्यालय और चिली के सार्वजनिक स्वास्थ्य संस्थान की विभिन्न प्रयोगशालाओं से सेल कल्चर नमूनों पर पारंपरिक पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन तकनीक के माध्यम से 16S rRNA जीन का पता लगाकर। नकारात्मक नियंत्रणों की तरह सकारात्मक नियंत्रणों में प्राप्त परिणामों ने पशु चिकित्सा विज्ञान संकाय में इस पद्धति की मान्यता की अनुमति दी और इसे चिली विश्वविद्यालय के जैव चिकित्सा विज्ञान संस्थान से संदिग्ध नमूनों पर लागू किया। इस निष्कर्ष को क्लस्टल Ω और BLAST सॉफ्टवेयर (दोनों ऑनलाइन फ्रीवेयर) का उपयोग करके न्यूक्लियोटाइड अनुक्रमों के संरेखण द्वारा सत्यापित किया गया, जिससे जीनबैंक® से माइकोप्लाज्मा एसपीपी के संबंध में 97% न्यूक्लियोटाइड पहचान प्रतिशत प्राप्त हुआ।