पशु चिकित्सा विज्ञान एवं चिकित्सा निदान जर्नल

शीतकालीन पेचिश रोग की सीरोलॉजिकल जांच के लिए पुनः संयोजक न्यूक्लियोकैप्सिड प्रोटीन-आधारित एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट परख का विकास

कनोक्वन सिंगासा, तवीसाक सोंगसेर्म, प्रीडा लेर्टवाचरसाराकुल, सिरिलुक जाला, सकुना फत्तनकुनानन और पिपत अरुणविपास

शीतकालीन पेचिश रोग एक तीव्र और संक्रामक वायरल रोग है जो थाईलैंड के खेतों में दुधारू मवेशियों को प्रतिकूल रूप से प्रभावित करता है। शीतकालीन पेचिश रोग के खिलाफ एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए विकसित किए गए पुनः संयोजक न्यूक्लियोकैप्सिड (आरएन) प्रोटीन पर आधारित एक अप्रत्यक्ष एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट परख (एलिसा) को एस्चेरिचिया कोली प्रोटीन अभिव्यक्ति प्रणाली द्वारा उत्पादित किया गया था। एपिटोप एंटीजन एन प्रोटीन को लगभग कुल एन जीन टुकड़ों (8-430 एए, एन जीन) का उपयोग करके डिज़ाइन किया गया था। इसे लगभग 48 केडीए आरएन प्रोटीन के रूप में पहचाना गया था और पश्चिमी धब्बा विश्लेषण द्वारा गोजातीय कोरोनावायरस डेयरी मवेशियों के सकारात्मक सीरम को बांध सकता है। एलिसा विधि की स्थितियों को अनुकूलित किया गया था। आरएन प्रोटीन को 5 μg / वेल की कोटिंग एंटीजन सांद्रता के साथ मानकीकृत किया गया था। आरएन प्रोटीन का परीक्षण संक्रमित और असंक्रमित डेयरी मवेशियों दोनों में सीरा के साथ किया गया था। प्राथमिक एंटीबॉडी के कमजोर पड़ने की पहचान चेकरबोर्ड अनुमापन का उपयोग करके 1:50 के रूप में की गई थी। इंट्रा- और इंटर-परख दोहराए जा सकते थे। औसत ± 2SD (मानक विचलन) से संशोधित OD450 मान का कट-ऑफ 0.049 पर स्थापित किया गया था। विकसित rNELISA और SVANOVIR® BCV-Ab ELISA किट के बीच विशिष्टता, संवेदनशीलता और सटीकता का प्रतिशत क्रमशः 96.3, 84.8 और 86.1% था। वाणिज्यिक परीक्षण किट की तुलना में विकसित ELISA का कोहेन का कप्पा मान 0.71 था। इन दोनों परीक्षणों से अवशोषण मूल्यों का सहसंबंध गुणांक 0.68 था। पुनः संयोजक न्यूक्लियोकैप्सिड प्रोटीन ELISA विधि गोजातीय कोरोनावायरस निदान और निगरानी के लिए सहायक हो सकती है।